Garnalennitrofuran AMOZ 0.03ppb Kenmerkende ELISA Kit For Milk Food Safety Gevoeligheid 96Wells/Kit

Nitrofuran AMOZ Diagnostische ELISA Kit voor Melk Gevoeligheid 0.03ppb 96Wells/Kit

 

1.Diagnostische ELISA-kitBeginsel

Deze detectiekit is gebaseerd op een competitieve enzymimmunoassay voor de detectie van AMOZ in monsters.Geconjugeerde antigenen zijn vooraf gecoat op strips met microwells.De AMOZ in het monster concurreert met het geconjugeerde antigeen dat vooraf is gecoat op de microwell-strip voor anti-AMOZ-antilichaam.Nadat het enzymconjugaat is toegevoegd, wordt TMB-substraat toegevoegd voor kleuring.De waarde van de optische dichtheid (OD) van een monster is negatief gecorreleerd met de AMOZ erin.Deze waarde wordt vergeleken met een standaardcurve en vervolgens wordt de AMOZ-concentratie verkregen.

 

2. Technische specificaties

 

Gevoeligheid: 0.03ppb

Incubatietemperatuur: 25℃

Incubatietijd: 30min~15min

Detectielimiet Weefsel, ei, honing: 0,1ppb

Kruisreactiepercentage

AMOZ 100%

AHD < 0,1%

AOZ < 0,1%

SEM < 0,1%

Herstelpercentage

Weefsel 80 ± 25%

Honing 75 ± 25%

Ei 95 ± 25%

 

3.Nitrofuran AMOZ ELISA-testkit voor voedselveiligheidComponenten

 

1	Micro-well-strips	12 strips waarvan 8 verwijderbaar putten elk
2	6 × standaardoplossing (elk 1 ml)	0ppb	0,03ppb
		0.09ppb	0,27ppb
		0,81ppb	2,43ppb
3	Enzym geconjugeerd	7ml	rode pet
4	Antilichaam werkende oplossing	7ml	blauwe pet
5	Substraat A	7ml	witte pet
6	SubstraatB	7ml	zwarte dop
7	Oplossing stoppen	7ml	gele dop
8	20× geconcentreerde wasbuffer	40ml	witte pet
9	2× geconcentreerde heroplossende oplossing	50ml	transparante dop
10	2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

 

4. Benodigde maar niet verstrekte materialen
1) Uitrusting: microplaatlezer, printer, homogenisator, stikstofdroger, vortexer, centrifuge, meetbuis, balans (reciproke 0,01 g), incubator, waterbad;
2) Micropipetten: enkelkanaals 20-200µL, 100-1000µL, meerkanaals 30-300µl;
3) Reagentia: NaOH, ethylacetaat, n-hexaan, HCl (ongeveer 36,5%), K2HPO4 · 3H2O

5. Monstervoorbereiding

instrueren
De volgende punten moeten worden aangepakt vóór elke vorm van monstervoorbehandeling:
1) Het experiment kan alleen wegwerptips gebruiken en de tips moeten worden vervangen bij het opzuigen van verschillende reagentia;
2) Vóór het experiment moet elke experimentele apparatuur worden schoongemaakt en indien nodig opnieuw worden gereinigd om te voorkomen dat verontreiniging de experimentele resultaten verstoort.

Oplossingsvoorbereiding vóór monstervoorbehandeling:
1) 0,1 M K2HPO4: los 11,4 g K2HPO4 3H2O op in gedeïoniseerd water tot 500 ml.
2) 1 M HCl: Los 8,6 ml HCl (ongeveer 36,5%) op in gedeïoniseerd water tot 100 ml.
3) 1 M NaOH: Los 4 g NaOH op in gedeïoniseerd water tot 100 ml.
4) Verdun 2× geconcentreerde heroplossende oplossing met gedeïoniseerd water in een verhouding van 1:1 (1 ml geconcentreerde heroplossende oplossing + 1 ml gedeïoniseerd water) om het monster opnieuw op te lossen.

 

5.1 Monstervoorbereiding

a)Zakdoek, eieren
1) Weeg 1 ± 0,05 g homogeen monster af, voeg 4 ml gedestilleerd water, 0,5 ml 1M HCl en 100 µl 2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) toe aan elk buisje en schud goed gedurende 2 minuten;
2) Incubeer een nacht bij 37°C (ongeveer 16 uur) of in een waterbad bij 56°C (2 uur).
3) Voeg 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 M NaOH en 6 ml ethylacetaat toe aan elk buisje en schud gedurende 30 seconden.
4) Centrifugeer bij kamertemperatuur (20-25 °C) boven 4000r/min gedurende 10 minuten (als er emulgering is of als de ethylacetaatlaag minder dan 3 ml is, incubeer het monster dan in een waterbad bij 80 °C gedurende 10 minuten en centrifugeer herhaaldelijk; of verhoog de snelheid en verleng de centrifugeertijd).
5) Breng de 3 ml ethylacetaatlaag over in een nieuw centrifugebuisje en damp droog met stikstof of lucht bij 50°C.
6) Los het gedroogde residu op in 2 ml n-hexaan, voeg 1 ml van de verdunde gereconstitueerde oplossing toe, meng goed gedurende 30 seconden, centrifugeer bij kamertemperatuur (20-25°C) met een snelheid van meer dan 4000 rpm gedurende 10 minuten;verwijder de bovenste n-hexaanfase.(Als er emulgering optreedt, verwijder dan de bovenste n-hexaanfase, incubeer het monster in een waterbad van 70 °C gedurende 10-20 minuten en centrifugeer herhaaldelijk).
7) Neem 50 µL van de onderste laag voor analyse.
Monsterverdunningsfactor: 2

b) schat
1) Weeg 2 ± 0,05 g homogeen monster (honing), voeg 4 ml gedestilleerd water, 0,5 ml 1 M HCl en 100 µL 2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) toe aan elk buisje, schud goed gedurende 2 minuten;
2) Incubeer een nacht bij 37°C (ongeveer 16 uur) of in een waterbad bij 56°C (2 uur).
3) Voeg 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 M NaOH en 6 ml ethylacetaat toe aan elk buisje en schud gedurende 30 seconden.
4) Centrifugeer bij kamertemperatuur (20-25 °C) boven 4000r/min gedurende 10 minuten (als er emulgering is of als de ethylacetaatlaag minder dan 3 ml is, centrifugeer het monster dan herhaaldelijk in een waterbad bij 80 °C gedurende 10 minuten; of verhoog de snelheid en verleng de centrifugeertijd).
5) Breng de 3 ml ethylacetaatlaag over in een nieuw centrifugebuisje en damp droog met stikstof of lucht bij 50°C.
6) Los het gedroogde residu op in 2 ml n-hexaan, voeg 1 ml verdunde gereconstitueerde oplossing toe, meng goed gedurende 30 seconden, centrifugeer bij kamertemperatuur (20-25°C) met een snelheid van 4000 omw/min of meer gedurende 10 minuten;verwijder de bovenste n-hexaanfase.(Als er emulgering optreedt, verwijder dan de bovenste n-hexaanfase, incubeer het monster in een waterbad van 70 °C gedurende 10-20 minuten en centrifugeer herhaaldelijk).
7) Neem 50 µL van de onderste laag voor analyse.
Monsterverdunningsfactor: 1

 

 

6. ELISA-procedure

6.1 Beschrijving
1) Breng alle reagentia en microwell-strips voor gebruik op kamertemperatuur (20-25°C);
2) Breng alle reagentia onmiddellijk na gebruik terug naar 2-8°C;
3) De reproduceerbaarheid van ELISA-assays is grotendeels afhankelijk van de consistentie van het wassen van de platen.Correcte werking van plaatwassen is de sleutel tot de ELISA-procedure;
4) Tijdens incubatie bij constante temperatuur moeten alle monsters en reagentia worden beschermd tegen licht en moet elke microplaat worden afgesloten met een afdekfolie.

6.2 Bedieningsprocedure
1) Plaats de kit gedurende minstens 30 minuten bij kamertemperatuur (20-25°C), houd er rekening mee dat elk reagens goed moet worden geschud en gemengd voor gebruik, en plaats de vereiste microwell-strips in het plaatframe.Ongebruikte microtiterplaten moeten opnieuw worden afgesloten en bewaard bij 2-8 °C, niet ingevroren.
2) Bereiding van de oplossing: 40 ml 20 x geconcentreerde wasbuffer 1:19 verdund met gedeïoniseerd water (1 deel 20 x geconcentreerde wasbuffer + 19 delen gedeïoniseerd water).Of bereid naar behoefte.
3) Nummering: nummer de microwells volgens de monsters en standaardoplossingen;elk monster en elke standaardoplossing moeten in tweevoud worden gemaakt en hun posities moeten worden genoteerd.
4) Voeg 50 μL monster of standaardoplossing toe aan aparte replicaputjes;voeg 50 µl enzymconjugaat toe aan elk putje, voeg vervolgens 50 µl werkoplossing voor antilichamen toe en schud de plaat met de hand om voorzichtig te mengen.Sluit de microtiterplaat af met een afdekfolie en incubeer gedurende 30 minuten bij 25°C.
5) Giet de vloeistof in de microwell-plaat, dep droog op absorberend papier, voeg 250 µL wasbuffer toe om de microwell-plaat 15-30 seconden te wassen, verwijder en dep droog met absorberend papier, herhaal 4-5 keer.(Als er luchtbellen zijn na het tikken, knip ze dan af met een schone punt).
6) Kleurontwikkeling: voeg 50 µl substraat A toe aan elk putje, gevolgd door 50 µl substraat B. Meng voorzichtig door de plaat met de hand te schudden en incubeer vervolgens in het donker bij 25 °C gedurende 15 minuten om de kleur te ontwikkelen.
7) Assay: voeg 50 μl stopoplossing toe aan elk putje.Meng voorzichtig door de plaat met de hand te schudden.Stel de golflengte van de microplaatlezer in op 450 nm om de OD-waarde van elk putje te bepalen.(Het wordt aanbevolen om OD-waarden bij dubbele golflengten 450/630nm binnen 5 minuten af ​​te lezen).

 

7. Resultaatbeoordeling

 

Er zijn twee methoden om de resultaten te beoordelen: de eerste is de ruwe beoordeling, de tweede is de kwantitatieve bepaling.Merk op dat de OD-waarde van het monster een negatieve correlatie heeft met de AMOZ-concentratie.

7.1 Kwalitatieve bepaling

Het concentratiebereik (ng/ml) van AMOZ kan worden verkregen door de gemiddelde OD-waarde van het monster te vergelijken met die van de standaardoplossing.Ervan uitgaande dat de OD-waarde van het monster Ⅰ 0,3 is en die van het monster Ⅱ 1,0 is, is de OD-waarde van standaardoplossingen: 2,243 voor 0 ppb, 1,816 voor 0,03 ppb, 1,415 voor 0,09 ppb, 0,74 voor 0,27 ppb, 0,313 voor 0,81 ppb , 0,155 voor 2,43 ppb, dienovereenkomstig is het concentratiebereik van het monsterⅠ 0,81 tot 2,43 ppb, en dat van het monsterⅡ is 0,09 tot 0,27 ppb.

7.2 Kwantitatieve bepaling

De gemiddelde waarden van de absorptiewaarden worden verkregen voor de gemiddelde OD-waarde (B) van het monster en de standaardoplossing gedeeld door de OD-waarde (B0) van de eerste standaardoplossing (0 standaard) en vervolgens vermenigvuldigd met 100%, dat wil zeggen ,

Percentage van absorptiewaarde =	B	×100%
	B0

B: de gemiddelde OD-waarde van het monster of de standaardoplossing

B0: de gemiddelde OD-waarde van de standaardoplossing van 0 ng/ml

Teken de standaardcurve met de absorptiepercentages van de standaardoplossing en de semilogaritmewaarden van de AMOZ-standaardoplossing (ng/mL) als respectievelijk Y- en X-as.Lees de overeenkomstige concentratie van het monster af van de standaardcurve door het absorptiepercentage ervan op te nemen in de standaardcurve.De resulterende waarde wordt vervolgens vermenigvuldigd met de overeenkomstige verdunningsvouw, waardoor uiteindelijk de AMOZ-concentratie in het monster wordt verkregen.

 

8. Zaken die aandacht nodig hebben
1) De kamertemperatuur is lager dan 25 ℃ of de reagenstemperatuur en het monster zijn niet teruggekeerd naar kamertemperatuur (20-25 ℃), waardoor de standaard OD-waarde afneemt.
2) Tijdens het wasproces zal het drogen van de microplaat gepaard gaan met de niet-lineariteit van de standaardkromme en de onbevredigende reproduceerbaarheid;ga daarom direct na het wassen door naar de volgende stap.
3) Goed mengen, anders is er een slechte reproduceerbaarheid.
4) De stopoplossing is 2 M zwavelzuuroplossing, vermijd contact met de huid.
5) Gebruik de kit niet na de vervaldatum.Het gebruik van verdunde of vervalste reagentia uit de kit kan leiden tot veranderingen in gevoeligheid en detectie-OD-waarden.Vervang geen reagentia uit verschillende partijen kits.
6) Sluit ongebruikte microtiterplaten opnieuw af in zelfsluitende zakken.Standaardoplossingen en kleurloze koppelaars zijn lichtgevoelig en kunnen niet direct aan licht worden blootgesteld.
7) Gooi elke kleuroplossing weg waarvan de kleur aangeeft dat de oplossing is afgebroken.Een detectiewaarde van minder dan 0,5 voor standaardoplossing 1 (0 ppb) duidt op degradatie.
8) De optimale reactietemperatuur is 25 ℃ en de detectiegevoeligheid en OD-waarde veranderen als de temperatuur te hoog of te laag is.
 

9. Bewaartermijn en geldigheidsduur
Bewaring: Bewaren bij 2-8°C, niet in de vriezer bewaren.
Vervaldatum: 12 maanden;productiedatum staat op de doos.
Opmerking: als de vacuümverpakking van de microplaat lekt, kan deze nog steeds worden gebruikt zonder de testresultaten te beïnvloeden, zodat u deze met een gerust hart kunt gebruiken.

 

 

Q1: Wanneer wordt het verzonden?
A1: We zullen de goederen zo snel mogelijk voor u verzenden binnen 7 werkdagen na ontvangst van de betaling.(In het geval van externe factoren zoals de epidemie, kan de levering worden vertraagd)

 

Q2: Ondersteunt het OEM/ODM?
A2: Het kan worden ondersteund, maar de specifieke hoeveelheid moet meer dan 100.000 stuks zijn, wat handig is voor op maat gemaakte producten.

 

Q3: Hoe doet uw fabriek het op het gebied van kwaliteitscontrole?
A3: We hebben nationaal ISO9001 en ISO13485 gecertificeerd.Ons productieproces voldoet aan standaardprocedures om een ​​optimale productkwaliteit te garanderen.

 

Vraag 4: Hoe kan ik after-sales service verlenen?
A4: Wij bieden professionele online technische after-sales service.Wij kunnen u een-op-een begeleiding geven via video, telefoon, etc.

 

Q5: Wat is de betaalmethode?
A5: Wij ontvangen betaling door T/T.

 

Q6: Hoe te verzenden?
A6: Kies de beste verzendmethode voor u door offertes op te vragen van onze vele coöperatieve vervoerders en verzend ook volgens uw vereisten.