MQCA Kenmerkende ELISA Kit For Chicken Pork Duck 96 Putten Kit Sensitivity 0,5 Ppb

MQCA ELISA Test Kit voor Kip Varkensvlees Eend 96 Wells/Kit Gevoeligheid 0.5 ppb

 

1. Principe

Deze testkit is gebaseerd op de competitieve enzymimmunoassay voor de detectie van MQCA in het monster.De koppelingsantigenen zijn vooraf gecoat op de strepen van de microwells.De MQCA in het monster en de koppelingsantigenen die vooraf zijn gecoat op de microwellstrips strijden om het anti-MQCA-antilichaam.Na de toevoeging van het enzymconjugaat wordt het TMB-substraat toegevoegd voor kleuring.De waarde van de optische dichtheid (OD) van het monster heeft een negatieve correlatie met de MQCA erin.Deze waarde wordt vergeleken met de standaardcurve en vervolgens wordt de MQCA-concentratie verkregen.

 

2. Technische specificaties

Gevoeligheid: 0,5 ppb
Incubatortemperatuur: 25℃
Incubatortijd: 30min~15min

Detectie limiet:
Weefsel 1 ppb

Kruisreactiepercentage:
MQCA 100%
Olaquindox <0,1%
Herstelpercentage:
Weefsel 85% ± 10%

 

3. Componenten

 

1	Micro-well-strips	12 strips met elk 8 verwijderbare wells
2	6 × standaardoplossing (elk 1 ml)	0 pb	0,5ppb
		1,5 pb	4,5 pb
		13,5 pb	40,5 pb
3	Geconcentreerd enzymconjugaat	1 ml	rode pet
4	Antilichaam werkende oplossing	8 ml	blauwe pet
5	Substraat A	7 ml	witte pet
6	SubstraatB	7 ml	zwarte dop
7	Oplossing stoppen	7 ml	gele dop
8	Opnieuw oplossende oplossing	50ml	transparante dop
9	20× geconcentreerde wasbuffer	40 ml	witte pet

 

4. Benodigde maar niet verstrekte materialen

1) Uitrusting: microplaatlezer (450 nm / 630 nm), homogenisator, oscillator, centrifuge, meetpipetten, stikstofdroogapparaat en balans (een gevoeligheid reciproque van 0,01 g), incubator.
2) Micropipetten: enkelkanaals 20 tot 200 µL en 100 tot 1000 µL en meerkanaals 30~300 µl;
3) Reagentia: Ethylacetaat, n-hexaan, HCl, NaCl, CH3CN

 

5. Monstervoorbehandeling

Instructies
De volgende punten moeten worden behandeld vóór de voorbehandeling van elk type monster:
1) Alleen de wegwerptips kunnen worden gebruikt voor de experimenten en de tips moeten worden vervangen wanneer ze worden gebruikt voor het absorberen van verschillende reagentia;
2) Vóór het experiment moet elk experimenteel gebruiksvoorwerp worden gecontroleerd op schoon en indien nodig opnieuw worden gereinigd om verontreiniging te voorkomen die de experimentele resultaten verstoort.

Voorbereiding van het monster
1) Monsterextract (Bewaren bij 2~8℃ gedurende 1 maand): Neem 8,6 ml geconcentreerde HCl, voeg gedeïoniseerd water toe aan 500 ml en voeg vervolgens 10 g NaCl toe om het monsterextract te krijgen.

5.1 Vee- en gevogelteweefsel (kip, eend, varken):
1. Neem 2 ± 0,05 g van het gehomogeniseerde monster in een centrifugebuis van 50 ml;
2. Voeg 4 ml monsterextract toe, schud grondig gedurende 1 minuut;
3. Voeg 4 ml ethylacetaat en 2 ml CH3CN toe, schud goed gedurende 10 seconden;Centrifugeer bij 4000 omw/min bij kamertemperatuur (20 - 25 ℃) gedurende 10 min (Opmerking: deze stap hoeft slechts 10 seconden te worden geschud, te lang schudden leidt tot emulgering, als er emulgering optreedt, neem dan een bepaald supernatant en schud de buis gedurende 5 seconden lichtjes , centrifugeer opnieuw en kan dan voldoende supernatant krijgen);
4. Neem 3 ml bovenlaag organische fase in een doorzichtige container, hieronder om te drogen met stikstof of lucht
56℃waterbad;
5. Voeg 1 ml N-hexaan toe, schud gedurende 30 seconden, voeg dan 0,5 ml heroplossende oplossing toe, schud en meng grondig gedurende 30 seconden;centrifugeer bij 4000 omw/min bij kamertemperatuur (20-25 ℃) gedurende 5 min.
6. Verwijder de organische fase van de bovenste laag. Neem 50 µL onderste laag voor analyse.
Verdunningsvouw van het monster: 0,5

 

6. ELISA-procedures

6.1 Instructies
1) Breng alle reagentia en micro-well strips voor gebruik op kamertemperatuur (20-25 ℃);
2) Breng alle reagentia onmiddellijk na gebruik terug naar 2-8 ℃;
3) De reproduceerbaarheid van de ELISA-analyse hangt grotendeels af van de consistentie van het wassen van de platen.De juiste werking van de plaatwassing staat centraal in de procedures van ELISA;
4) Voor de incubatie bij constante temperaturen moeten alle monsters en reagentia worden blootgesteld aan licht en moet elke microtiterplaat worden afgesloten door het afdekmembraan.

6.2 Bedieningsprocedures
1) Haal alle benodigde reagentia eruit en plaats ze gedurende minstens 30 minuten op kamertemperatuur (20-25 ℃).Merk op dat elk reagens vóór gebruik moet worden geschud om gelijkmatig te mengen;
2) Neem de vereiste microwell-strips en plaatframes.Verzegelde de ongebruikte microplaat opnieuw, opgeslagen bij 2- 8 ℃;
3) Bereiding van de oplossing: verdun 40 ml van de 20× geconcentreerde wasbuffer met gedeïoniseerd water van 1:19 (1 deel 20× geconcentreerde wasbuffer + 19 delen gedeïoniseerd water), of bereid de hoeveelheid die nodig is;
4) Nummering: nummer de micro-wells volgens monsters en standaardoplossing;elk monster en elke standaardoplossing moet in tweevoud worden uitgevoerd;noteer hun posities;
5) Bereid een mixoplossing van antilichaamwerkoplossing en geconcentreerd enzymconjugaat voor: meng antilichaamwerkoplossing en geconcentreerd enzymconjugaat in een verhouding van 10:1 gelijkmatig (1000ul antilichaamwerkoplossing + 100ul geconcentreerd enzymconjugaat, deze mixoplossing moet na bereiding worden gebruikt, het kan niet worden opgeslagen, de pakkethoeveelheid heeft een extra hoeveelheid, bereidt zich voor als aandeel in orde is.)
6) Voeg 20 µL van het monster of de standaardoplossing toe aan afzonderlijke duplicaatputjes, voeg vervolgens 70 µL gemengde oplossing van antilichaamwerkoplossing en geconcentreerd enzymconjugaat toe aan elk putje.Meng door zachtjes te schudden, verzegel de microplaat met het afdekmembraan en incubeer bij 25 ℃ in het donker gedurende 30 minuten;
7) Was de microtiterplaat vier tot vijf keer met de wasbuffer bij 250 µL/putje;week het putje met de wasbuffer gedurende 15-30 sec, flap om te drogen met absorberend papier (als er luchtbellen zijn na het fladderen, knip ze dan af met de schone tips);
8) Kleuring: voeg 50 µL van de oplossing van substraat A en 50 µL van de oplossing van B toe aan elk putje.Meng door zachtjes te schudden en incubeer bij 25 ℃ gedurende 15 minuten in het donker voor kleuring;
9) Bepaling: voeg 50 µL stopoplossing toe aan elk putje.Meng door zachtjes te schudden.Stel de golflengte van de microplaatlezer in op 450 nm om de OD-waarde te bepalen.(raad aan om de OD-waarde bij de dubbele golflengte 450/630 nm binnen 5 min te lezen).

 

7. Resultaatbeoordeling

Er zijn twee methoden om de resultaten te beoordelen;de eerste is het ruwe oordeel, terwijl de tweede de kwantitatieve bepaling is.Merk op dat de OD-waarde van het monster een negatieve correlatie heeft met de inhoud van MQCA.

7.1 Kwalitatieve bepaling
Het concentratiebereik (ng/ml) kan worden verkregen door de gemiddelde OD-waarde van het monster te vergelijken met die van de standaardoplossing.Ervan uitgaande dat de OD-waarde van het monster Ⅰ 0,3 is en die van het monster Ⅱ 1,0, terwijl die van de standaardoplossingen als volgt zijn: 2,043 voor 0 ppb, 1,716 voor 0,5 ppb, 1,215 voor 1,5 ppb, 0,74 voor 4,5 ppb, 0,313 voor 13,5 ppb en 0,155 voor 40,5 ppb, dienovereenkomstig is het concentratiebereik van het monsterⅠ 13,5 tot 40,5 ppb en dat van het monster Ⅱ is 1,5 tot 4,5 ppb.

7.2 Kwantitatieve bepaling
De gemiddelde waarde van de absorptiewaarden is gelijk aan het percentage van de gemiddelde OD-waarde (B) van het monster en de standaardoplossing gedeeld door de OD-waarde (B0) van de eerste standaardoplossing (0 standaard) en vervolgens vermenigvuldigd met 100% , dat is,

 

Percentage van absorptiewaarde =	B	×100%
	B0

 

 

B—de gemiddelde (dubbele wells) OD-waarde van het monster of de standaardoplossing
B0: de gemiddelde OD-waarde van de standaardoplossing van 0 ng/ml
Teken de standaardcurve met de absorptiepercentages van de standaardoplossingen en de semilogaritmewaarden van de MQCA-standaardoplossingen (ng/mL) als respectievelijk Y- en X-as.Lees de overeenkomstige concentratie van het monster af van de standaardcurve door het absorptiepercentage ervan op te nemen in de standaardcurve.De resulterende waarde wordt vervolgens vermenigvuldigd met de overeenkomstige verdunningsvouw, waardoor uiteindelijk de MQCA-concentratie in het monster wordt verkregen.
Het gebruik van de professionele analysesoftware van deze kit is handiger voor de nauwkeurige en snelle analyse van een groot aantal monsters.(Neem contact met ons op voor deze software)

 

8. Voorzorgsmaatregelen

1. De kamertemperatuur onder 25 ℃ of de temperatuur van de reagentia en de monsters die niet op kamertemperatuur komen (20-25 ℃) zal leiden tot een lagere standaard OD-waarde
2. Droogte van de microtiterplaat tijdens het wasproces gaat gepaard met de situaties waaronder de niet-lineaire standaardkrommen en de ongewenste reproduceerbaarheid
3. Meng elk reagens en reactiemengsel gelijkmatig en was de microplaat grondig, anders ontstaat er een ongewenste reproduceerbaarheid
4. De stopoplossing is de 2 M zwavelzuuroplossing, vermijd contact met de huid;
5. Plaats de ongebruikte microtiterplaat in een zelfsluitende zak om deze opnieuw te sluiten.De standaardstof en de kleurloze kleurvormer zijn lichtgevoelig en kunnen dus niet direct aan licht worden blootgesteld
6. Gebruik de kit niet langer dan de vervaldatum.Het gebruik van verdunde of vervalste reagentia uit de kits zal leiden tot veranderingen in de gevoeligheid en de detectie van OD-waarden.Wissel de reagentia uit de kits met verschillende lotnummers niet uit om te gebruiken
7. Gooi de kleuroplossing weg met een kleur die de degeneratie van deze oplossing aangeeft.De detectiewaarde van de 0-standaardoplossing van minder dan 0,5 geeft de degeneratie aan
8. De optimale reactietemperatuur is 25 ℃, en te hoge of te lage temperaturen leiden tot veranderingen in de detectiegevoeligheid en OD-waarden.

 

9. Opslag en vervaldatum

Opslag: bewaren bij 2-8 ℃, niet ingevroren.
Vervaldatum: 12 maanden;productiedatum staat op de doos.
Opmerking: als het vacuümpakket van de microplaat lekt, is het nog steeds geldig om te gebruiken, heeft het geen invloed op het testresultaat, wees ontspannen om te gebruiken.

 

 

 

 

 

Q1: Wanneer wordt het verzonden?
A1: We zullen de goederen zo snel mogelijk voor u verzenden binnen 7 werkdagen na ontvangst van de betaling.(In het geval van externe factoren zoals de epidemie, kan de levering worden vertraagd)

 

Q2: Ondersteunt het OEM/ODM?
A2: Het kan worden ondersteund, maar de specifieke hoeveelheid moet meer dan 100.000 stuks zijn, wat handig is voor op maat gemaakte producten.

 

Q3: Hoe doet uw fabriek het op het gebied van kwaliteitscontrole?
A3: We hebben nationaal ISO9001 en ISO13485 gecertificeerd.Ons productieproces voldoet aan standaardprocedures om een ​​optimale productkwaliteit te garanderen.

 

Vraag 4: Hoe kan ik after-sales service verlenen?
A4: Wij bieden professionele online technische after-sales service.Wij kunnen u een-op-een begeleiding geven via video, telefoon, etc.

 

Q5: Wat is de betaalmethode?
A5: Wij ontvangen betaling door T/T.

 

Q6: Hoe te verzenden?
A6: Kies de beste verzendmethode voor u door offertes op te vragen van onze vele coöperatieve vervoerders en verzend ook volgens uw vereisten.