Amantadine Kenmerkende ELISA Kit For Chicken Pork Duck 96 Putten Kit Sensitivity 0,2 Ppb

Amantadine ELISA Test Kit voor Kip Varkensvlees Eend 96 Wells/Kit Gevoeligheid 0.2 ppb

 

1. Principe

Deze testkit is gebaseerd op de competitieve enzymimmunoassay voor de detectie van amantadine.Het koppelingsantigeen is vooraf gecoat op de strepen van de microwells.De amantadine in het monster en de koppelingsantigenen die vooraf zijn gecoat op de microwell-strepen strijden om de anti-amantadine-antilichamen.Na de toevoeging van het enzymconjugaat wordt het TMB-substraat toegevoegd voor kleuring.De waarde van de optische dichtheid (OD) van het monster heeft een negatieve correlatie met de amantadine in het monster.Deze waarde wordt vergeleken met de standaardkromme en vervolgens worden de amantadineresten verkregen.

 

2. Technische specificaties

Gevoeligheid: 0,2 ppb
Incubatortemperatuur: 25℃
Incubatortijd: 30min~15min

Detectie limiet:
Kip, eend 0,2 ppb

Kruisreactiepercentage:
Amantadine 100%

Herstelpercentage:
Kip, eend 90±25%

 

3. Componenten

 

1	Micro-well-strips	12 strips met elk 8 verwijderbare wells
2	6 × standaardoplossing (elk 1 ml)	0ppb	0,2ppb
		0,8ppb	3,2ppb
		12,8ppb	51,2ppb
3	Enzym geconjugeerd	7ml	rode pet
4	Antilichaam werkende oplossing	7ml	blauwe pet
5	Substraat A	7ml	witte pet
6	SubstraatB	7ml	zwarte dop
7	Oplossing stoppen	7ml	gele dop
8	Extractiemiddel	50ml*2	transparante dop
9	20× geconcentreerde wasbuffer	15ml	witte pet
10	5× geconcentreerde heroplossende oplossing	10ml	witte pet

 

4. Benodigde maar niet verstrekte materialen

 

1) Uitrusting: ELISA-lezer (450 nm/630 nm), homogenisator, shaker, centrifuge, balans: 0,01 g hoeveelheidsgevoelig, stikstofdroogapparaat, incubator, maatpipetten, printer

2) Micropipetten: eenkanaals 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, meerkanaals 30~300 μl

3) Reagentia: Acetonitril, n-hexaan.

 

5. Monstervoorbehandeling

 

Instructies (de volgende punten moeten vóór de voorbehandeling worden behandeld)

1) Alleen de wegwerptips kunnen worden gebruikt voor de experimenten en de tips moeten worden vervangen wanneer ze worden gebruikt voor het absorberen van verschillende reagentia;

2) Vóór het experiment moet elk experimenteel gebruiksvoorwerp schoon zijn en indien nodig opnieuw worden gereinigd om verontreiniging te voorkomen die de experimentele resultaten verstoort.

 

Oplossingsvoorbereiding vóór monstervoorbehandeling:

1) Monsterextractoplossing

6 delen Acetonitril + 1 deel Extractant om de gebruiksklare monsterextractoplossing te verkrijgen.

2) Neem een ​​monster van de opnieuw oplossende oplossing

Gebruik 1 deel geconcentreerde heroplossende oplossing (5X) en los op met 4 delen gedeïoniseerd water om de gebruiksklare heroplossende oplossing te verkrijgen.

Voorbereiding van monsters

 

5.1 Bereiding van kip, eend monster

1) Neem 3,0 ± 0,05 g gehomogeniseerd weefselmonster in een centrifugebuis van 50 ml;voeg 6ml de oplossing van het steekproefuittreksel toe, schud 3min, centrifugeer bij meer dan 4000r/min bij kamertemperatuur (20 - 25 ℃) 5 min;

2) Neem 2ml heldere organische fase in een droge container, blaas om te drogen met stikstof of lucht bij 50~60 ℃;

3) Voeg eerst 1 ml n-hexaan toe, voeg vervolgens 0,5 ml monsteroplossing toe, meng gedurende 30 seconden, centrifugeer bij meer dan 4000 r/min bij kamertemperatuur (20 - 25 ℃) gedurende 5 minuten, gooi de bovenste laag n-hexaan weg;

4) Nemen-laag vloeistof 50μl om te testen

Verdunningsfactor: 0,5

 

6. ELISA-procedures

 

6.1Instructies

1. Breng ELISA-reagentia vóór gebruik op kamertemperatuur (20 - 25 °C).

2. Zet ELISA-reagentia onmiddellijk na gebruik terug op 2-8 ℃

3. De ELISA-reproduceerbaarheid in het analyseproces hangt grotendeels af van de consistentie van de wasplaat, de juiste werking van de wasplaat is het punt van bepaling ELISA-programma

4. Vermijd bij alle incubatieprocessen bij constante temperatuur blootstelling aan licht en sluit de microtiterplaat af met het afdekmembraan

 

6. 2 Bedieningsprocedures

1. Breng de testkit gedurende minimaal 30 minuten op kamertemperatuur (20-25 ℃), merk op dat elk reagens voor gebruik gelijkmatig moet worden geschud;

2. Plaats de vereiste microwell-strips in plaatframes.De ongebruikte microplaat opnieuw verzegeld, bewaard bij 2-8 ℃, niet bevroren.

3. Bereiding van de oplossing: verdun de 15ml 20× geconcentreerde wasbuffer met gedeïoniseerd water tot 300ml.

4. Nummering: nummer de micro-wells volgens monsters en standaardoplossing;elk monster en elke standaardoplossing moet in tweevoud worden uitgevoerd;noteren hun posities.

5. Voeg standaard/monster toe: Voeg 50 µL van het monster of de standaardoplossing toe aan afzonderlijke duplicaatputjes, voeg vervolgens enzymconjugaat toe, 50 µL/putje;vervolgens antilichaam-werkoplossing, 50 μL/putje.Meng voorzichtig door de plaat handmatig te schudden, verzegel de microplaat met het afdekmembraan, incubeer bij 25 °C gedurende 30 minuten in het donker.

6. Was de microplaat: open voorzichtig het dekselmembraan, giet vloeistof uit de microwell;voeg 250 µL/putje verdunde wasbuffer toe, was 4-5 keer volledig, 15-30 seconden per keer, haal het eruit en laat het drogen met absorberend papier.

7. Kleuring: voeg 50 µL van substraat A-oplossing en vervolgens 50 µL B-oplossing toe aan elk putje.Meng voorzichtig door de plaat handmatig te schudden en incubeer bij 25 °C gedurende 15 minuten in het donker voor kleuring.

8. Bepaling: voeg 50 µL van de stopoplossing toe aan elk putje.Meng voorzichtig door de plaat handmatig te schudden.Stel de golflengte van de microplaatlezer in op 450 nm om de OD-waarde van elk putje te bepalen.(Raad aan om de OD-waarde bij de dubbele golflengte 450/630nm binnen 5 minuten te lezen).

 

7. Resultaatbeoordeling

Er zijn twee methoden om de resultaten te beoordelen;de eerste is het ruwe oordeel, terwijl de tweede de kwantitatieve bepaling is.Merk op dat de OD-waarde van het monster een negatieve correlatie heeft met de amantadine in het monster

7.1 Kwalitatieve bepaling
Het concentratiebereik (ng/ml) kan worden verkregen door de gemiddelde absorptiewaarde te vergelijken met standaarden.Stel dat de absorptiewaarde van monster één 0,3 is, monster twee 1,0 en de normen zijn: 0 ppb van 2,243;0,2 ppb van 2.054;0,8 ppb van 1,715;3,2 ppb van 1.074;12,8 ppb van 0,451;51,2 ppb van 0,155.Dan ligt de concentratie van het monster in het bereik van 12,8 ppb ~ 51,2 ppb;Voorbeeld twee is 3,2 ppb ~ 12,8 ppb.Het concentratiebereik van amantadine in de monsters kan worden verkregen door te vermenigvuldigen met de overeenkomstige verdunning van het monster.
 

7. 2 Kwantitatieve analyse
Om de concentratie van monsters te berekenen, moet een standaardcurve worden gemaakt.Voordat de standaardcurve wordt gemaakt, moet het concept van % absorptie bekend zijn.
Berekening van % absorptie:

 

Percentage van absorptiewaarde =	B	×100%
	B0

 

B: de gemiddelde OD-waarde van het monster of de standaardoplossing
B0: de gemiddelde OD-waarde van de standaardoplossing van 0 ng/ml
De nulnorm wordt dus gelijk gemaakt aan 100 % en de absorptiewaarden worden uitgedrukt in procenten.De berekende waarden voor de standaarden worden ingevoerd in een coördinatenstelsel op semilogaritmisch grafiekpapier tegen de amantadineconcentratie [ng/mL].De amantadineconcentratie in ng/ml (ppb) die overeenkomt met de absorptie van elk monster kan worden afgelezen van de kalibratiecurve.
Een speciale software voor resultaatanalyse van ELISA zal dubbele of meervoudige bepalingen vergemakkelijken.Als je nodig hebt, bel dan om te vragen.

 

8. Voorzorgsmaatregelen

 

1. De standaard OD-waarde is laag als de kamertemperatuur lager is dan 25 ℃ of de reagenstemperatuur en het monster niet is teruggekeerd naar kamertemperatuur (20-25 ℃).
2. De microplaat wordt gedroogd tijdens het wasproces, wat gepaard gaat met niet-lineariteit van de standaardkromme en slechte reproduceerbaarheid;ga daarom direct na het wassen door naar de volgende stap.
3. Meng goed voordat u reagentia toevoegt.
4. De stopoplossing is 2M zwavelzuuroplossing, vermijd contact met de huid.
5. Gebruik de kit niet na de vervaldatum.Het gebruik van verdunde of vervalste reagentia uit de kit kan leiden tot veranderingen in gevoeligheid en detectie-OD-waarden.Vervang geen reagentia in verschillende partijen kits.
6. Bewaring: Bewaren bij 2-8°C, niet in de vriezer bewaren.Sluit ongebruikte microtiterplaten opnieuw af in zelfsluitende zakken.Standaardmaterialen en kleurloze koppelaars zijn lichtgevoelig en kunnen niet direct aan licht worden blootgesteld.
7. Gooi elke kleuroplossing weg waarvan de kleur aangeeft dat de oplossing is afgebroken.De detectiewaarde (450/630nm) van 0 standaardoplossing (0 ppb) is minder dan 0,5 ((A450nm<0,5)) wat de denaturatie aangeeft.
8. De optimale reactietemperatuur is 25℃.Als de temperatuur te hoog of te laag is, veranderen de detectiegevoeligheid en OD-waarde.

 

9. Opslag en vervaldatum

Opslag: bewaren bij 2-8 ℃, niet ingevroren.
Vervaldatum: 12 maanden;productiedatum staat op de doos.
Opmerking: als het vacuümpakket van de microplaat lekt, is het nog steeds geldig om te gebruiken, heeft het geen invloed op het testresultaat, wees ontspannen om te gebruiken.

 

 

 

 

 

Q1: Wanneer wordt het verzonden?
A1: We zullen de goederen zo snel mogelijk voor u verzenden binnen 7 werkdagen na ontvangst van de betaling.(In het geval van externe factoren zoals de epidemie, kan de levering worden vertraagd)

 

Q2: Ondersteunt het OEM/ODM?
A2: Het kan worden ondersteund, maar de specifieke hoeveelheid moet meer dan 100.000 stuks zijn, wat handig is voor op maat gemaakte producten.

 

Q3: Hoe doet uw fabriek het op het gebied van kwaliteitscontrole?
A3: We hebben nationaal ISO9001 en ISO13485 gecertificeerd.Ons productieproces voldoet aan standaardprocedures om een ​​optimale productkwaliteit te garanderen.

 

Vraag 4: Hoe kan ik after-sales service verlenen?
A4: Wij bieden professionele online technische after-sales service.Wij kunnen u een-op-een begeleiding geven via video, telefoon, etc.

 

Q5: Wat is de betaalmethode?
A5: Wij ontvangen betaling door T/T.

 

Q6: Hoe te verzenden?
A6: Kies de beste verzendmethode voor u door offertes op te vragen van onze vele coöperatieve vervoerders en verzend ook volgens uw vereisten.